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藥物分析中液相色譜柱的常見問題盤點
來源：測試GO 時間：2022-11-15 14:00:24 瀏覽：3527次

Q1、什么是反相柱、正相柱？

 液相色譜儀

答：“反相”和“正相”的概念是液相色譜法早期提出的概念，當時鍵合相色譜柱尚未出現，固定相被涂覆在載體表面，極易流失，為此科學家對流動相使用給出了合理的建議：流動相極性與固定液極性應具有較大差別，以減少固定液流失。固定相極性弱于流動相時的液相色譜法被稱為反相色譜法，固定相極性強于流動相時的液相色譜法被稱為正相色譜法。盡管目前鍵合相色譜柱已成為主流，但這一概念在色譜方法開發、預測出峰順序等方面具有重要意義。

 

由上面的介紹可知具體的色譜方法、色譜柱屬于正相還是反相不僅取決于固定相極性，同時還取決于流動相極性。C18（硅膠鍵合十八烷基硅烷）、C8（硅膠鍵合辛基硅烷）、PH（硅膠鍵合苯基硅烷）等色譜柱，由于固定相極性極低，比目前已知的任何流動相的極性都要低，因而是標準的反相柱；

 

Silica（硅膠）、NH2（硅膠鍵合氨丙基硅烷）具有較高的極性，主要用于分離帶有極性基團的化合物，所用流動相的極性通常低于這些固定相，因而是標準的正相柱。CN（硅膠鍵合腈丙基）的極性適中，當流動相極性超過CN時，它屬于反相柱，反之則是正相柱。

 

Q2、色譜柱規格對分析結果會產生何種影響？

 

答：色譜柱內徑決定載樣量，載樣量與內徑的平方成正比；色譜柱長度與塔板數成正比，與柱壓成正比；粒徑影響渦流擴散相，粒徑越小渦流擴散相越小，柱效越高，粒徑與柱效近似成反比；粒徑越小，壓力也越大，壓力與粒徑的平方成反比。填料孔徑對分析對象的分子量有限制，當孔徑為分析物尺寸的5倍以上時，分析物才能順利通過孔隙，孔徑處于60~120 ?的色譜柱適用于相對分子量小于10000的分析物，孔徑為300 ?的色譜柱可以滿足分子量處于10000以上的大分子化合物分析。 

 

Q3、柱床塌陷和鍵合相塌陷

 

答：柱床塌陷是指色譜柱使用一段時間后色譜柱入口處的柱床產生可見的空隙。該空隙的存在增大了死體積，會導致色譜柱柱效下降。造成柱床塌陷的原因如下：

其一，色譜柱填裝時的壓力過低，填裝不緊密，在高壓下使用一段時間，開始出現空隙；

其二，操作壓力超出色譜柱填料的耐壓值，導致填料顆粒破碎產生空隙；

其三，流動相溶解填料導致空隙出現。鍵合相塌陷是指由于流動相極性與鍵合相極性相差太大，鍵合相無法在流動相中充分伸展而倒伏、纏結在一起，比如普通C18在純水相條件下。相塌陷會導致色譜柱對化合物的保留不足。


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全部 3小時前 四川
文字是人類用符號記錄表達信息以傳之久遠的方式和工具。現代文字大多是記錄語言的工具。人類往往先有口頭的語言后產生書面文字，很多小語種，有語言但沒有文字。文字的不同體現了國家和民族的書面表達的方式和思維不同。文字使人類進入有歷史記錄的文明社會。
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