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克隆形成

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項目介紹

細胞克隆形成率即細胞接種存活率,是測定單個細胞增殖能力的有效方法,指單個細胞在體外持續增殖6代以上其后所形成的細胞群,形成肉眼可見的克隆,通過計數得出克隆形成率,可對受檢細胞的增殖潛力作定量分析,可以反映細胞群體依賴性和增殖能力兩個重要性狀。常用方法有平板克隆形成和軟瓊脂克隆形成。常用于抗腫瘤藥物敏感性測定、基因治療、腫瘤放射生物學等方面的研究。

樣品要求

1、平板克隆形成試驗方法簡單,適用于貼壁生長的細胞(細胞生長快慢均可)。適宜底物為玻璃的、塑料瓶皿。

2、軟瓊脂培養克隆形成試驗適用于懸浮生長的細胞以及繁殖較快的貼壁細胞。

3、請填寫完整送樣單或提供詳細的實驗方案。


項目案例

光學顯微鏡下的克隆細胞

克隆形成原始圖

常見問題
1、克隆形成的目的?

1)通過對細胞處理后在細胞培養板上的克隆形成能力來提示處理后細胞的增殖能力。

2)評價不同殺傷因素(藥物、基因等)對腫瘤細胞增殖能力或群體依賴性的敏感性;

3)評價細胞在體內成瘤性,癌細胞不一定都可以在體內成瘤,但若體外克隆能力越強,即表明體內成瘤性越強,算是一種模擬體內成瘤的體外實驗。

2、克隆形成的分類?

克隆形成依據采用的培養介質的不同,分為平板克隆和軟瓊脂克隆兩類。

1. 平板克隆形成(Colony formation):細胞培養在培養基中,應用于貼壁的細胞。

2. 軟瓊脂克隆形成(soft agar colony formation):細胞被瓊脂糖掛起來,主要應用于懸浮的腫瘤細胞和轉化細胞系。

3、2種細胞克隆方式,如何選擇?

根據實驗對象和目的選擇,平板克隆檢測貼壁腫瘤細胞的增殖能力和致瘤性,軟瓊脂克隆形成實驗除了檢測貼壁細胞,還能檢測懸浮腫瘤細胞和轉化細胞系,具有平板克隆不可取代的優勢。若只是簡單評價貼壁細胞的增殖能力和群體依賴性,則選擇平板克隆即可。

克隆形成

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