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氨基酸分析儀的介紹和基本原理、應用
來源: 時間:2022-12-05 10:35:25 瀏覽:8612次
用來進行蛋白質、肽及其他藥物制劑的氨基酸組成或含量的測定的儀器,稱為氨基酸分析儀。必須先蛋白質及肽水解成單個氨基酸,然后再進行氨基酸分析。其是以陽離子交換柱分離、柱后茚三酮衍生、光度法測定為基準的離子交換色譜儀。

和普通HPLC相比較,儀器有著相似的基本結構。然而針對氨基酸分析進行了如氮氣保護、惰性管路、在線脫氣、洗脫梯度及柱溫梯度控制等細節(jié)優(yōu)化。

簡介



基本原理

氨基酸混合物在流動相(緩沖溶液)的推動下從裝有陽離子交換樹脂的色譜柱流經流經,各氨基酸與樹脂中的交換基團交換離子。當洗脫時使用的pH緩沖溶液不同時,氨基酸混合物由于不同的交換能力而分離,分離出的單個氨基酸組分與茚三酮試劑發(fā)生反應,生成紫色化合物或黃色化合物,其在570nm、440rnn的吸光度用可見光檢測器進行檢測。這些有色產物對應的吸收強度與洗脫出來的各氨基酸濃度之間的關系和朗伯-比爾定律相符合。以此為依據可以定性、定量分析氨基酸各組分氨基酸分析儀也可利用陰離子交換分離后經積分脈沖安培法檢測。此檢測方法不需要柱前或柱后衍生待測氨基酸。

系統(tǒng)

一般細分為蛋白水解分析系統(tǒng)(鈉鹽系統(tǒng))和游離氨基酸分析系統(tǒng)(鋰鹽系統(tǒng))兩種系統(tǒng)。梯度洗脫利用不同濃度和pH值的檸檬酸鈉或檸檬酸鋰來進行。在這當中,鈉鹽系統(tǒng)每次分析的氨基酸至多能夠達到大約25種。有比較快的速度以及比較好的基線平直度;鋰鹽系統(tǒng)每次分析的氨基酸至多能夠達到大約50種,然而和鈉鹽系統(tǒng)相比,速度比較慢,也沒有較好的基線平直度。

效果

相比較于目前已知的氨基酸分析方法,和HPLC柱前衍生方法相比較,除了靈敏度(Zdi檢測限)稍低以外,在如分離度、重現(xiàn)性、操作簡便性、運行成本等其他方面,都比其他分析方法要好。

特點

1、高靈敏度:

按照蛋白水解液標準作為例子,能夠檢測到3pmoL。


2、快速、高分辨率:

水解氨基酸僅需半個小時的分析時間,生理體液僅需110分鐘。


3.柱后衍生技術:

和氨基酸反應之前才混合兩種反應液,使反應液的使用期限得到了有效的延長,并且不需要額外的制冷裝置存放。


4、氨氣排除系統(tǒng):

除氨柱増加了,能夠將氨在分析過程中對基線及峰形的干擾很好地進行排除。

應用

(一)農業(yè)、食品、飲料及其它

檢驗測定茶氨酸來鑒別真?zhèn)尾枞~

對醬油級別的認定

對玉米、大豆、小麥等農作物的氨基酸含量進行檢測

對果汁、飲料進行真?zhèn)蔚蔫b別


(二)飼料上的應用

真?zhèn)舞b別

賴氨酸、蛋氨酸含量高是魚粉氨基酸組成特點,真?zhèn)瓮ㄟ^對氨基酸的分析很容易就可以辨別


質量控制

各種飼料必需氨基酸的含量和它們之間的比例必須恰當,為了使質量得到保證,需要對原料和產品中的氨基酸含量進行測定。


(三)醫(yī)學上的應用

必需氨基酸在創(chuàng)傷愈合中的關系

腫瘤組織氨基酸代謝的變化規(guī)律

氨基酸代謝異常角度闡述了氨基酸與肝性腦病的關系

血清中11種游離氨基酸的降低可直接影響人體組織的正常發(fā)育、生長

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全部 3小時前 四川
文字是人類用符號記錄表達信息以傳之久遠的方式和工具。現(xiàn)代文字大多是記錄語言的工具。人類往往先有口頭的語言后產生書面文字,很多小語種,有語言但沒有文字。文字的不同體現(xiàn)了國家和民族的書面表達的方式和思維不同。文字使人類進入有歷史記錄的文明社會。
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