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項(xiàng)目介紹

以體外細(xì)胞模型來(lái)替代動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，建立藥物體外ADME模型，具有簡(jiǎn)單、快速、高通量等優(yōu)點(diǎn)，當(dāng)前的體外模型主要依靠二維或者簡(jiǎn)單的三維細(xì)胞培養(yǎng)體系，適用于早期化合物的篩選。其中，主要涉及的實(shí)驗(yàn)有溶解性分析，LogD，肝微粒體穩(wěn)定性分析，肝臟細(xì)胞穩(wěn)定性分析，CYP450，Caco-2藥物腸道通透性，血漿蛋白結(jié)合率等實(shí)驗(yàn)。

樣品要求

樣品含量需與工作人員溝通。

項(xiàng)目案例
常見(jiàn)問(wèn)題
1、化合物在肝微粒體、S9和肝細(xì)胞中的代謝穩(wěn)定性差異較大，該如何取舍？

依據(jù)研究目的和階段進(jìn)行選擇，在高通量篩選階段沒(méi)必要過(guò)多的考慮三者之間的差別，不同化合物在三者之間的大小關(guān)系基本不會(huì)發(fā)生很大的變化，推薦肝微粒體代謝穩(wěn)定性將化合物進(jìn)行區(qū)分即可。若用于某一化合物人體清除率的準(zhǔn)確預(yù)測(cè)，雖然理論上肝細(xì)胞更接近體內(nèi)實(shí)際情況，但實(shí)際上并非依據(jù)肝細(xì)胞的預(yù)測(cè)值一定更準(zhǔn)確，可以多個(gè)基質(zhì)同時(shí)進(jìn)行，結(jié)合臨床前各種屬體內(nèi)清除率的實(shí)測(cè)值，選擇相關(guān)性最好的基質(zhì)進(jìn)行人體清除率預(yù)測(cè)。

2、為什么體外穩(wěn)定性結(jié)果很慢，體內(nèi)清除率很高或者半衰期很短？

首先，采用穩(wěn)定性研究預(yù)估化合物體內(nèi)清除率的需建立于一種重要的前提假設(shè)，即化合物的清除途徑主要依賴化合物的代謝過(guò)程。化合物體內(nèi)清除亦可能包括膽汁排泄、腎臟排泄等非肝臟代謝清除途徑，發(fā)生該類(lèi)情況后應(yīng)及時(shí)驗(yàn)證是否有其他清除途徑，及時(shí)調(diào)整研究策略。其次，需考慮體外代謝體系是否包含了所有體內(nèi)的主要代謝酶，是否存在non-cyp代謝途徑。此外，亦可將消除器官的相關(guān)轉(zhuǎn)運(yùn)體納入考慮范圍。

3、為什么體外穩(wěn)定性結(jié)果很快，體內(nèi)清除率很低或者半衰期很長(zhǎng)？

首先，從化合物在體外和體內(nèi)暴露過(guò)程的差異去考慮，包括暴露濃度、游離藥物比例差異、是否包含膜屏障等。即化合物在不同濃度下的代謝速率是否存在差異，或體內(nèi)代謝器官中游離藥物濃度較低是否限制了其代謝速率，亦或化合物透過(guò)肝細(xì)胞膜的能力較差限制了其被代謝的可能。其次，注意區(qū)分清除率和半衰期的概念，即使化合物在高清除率或不穩(wěn)定的情況下，較廣的分布同樣可以延長(zhǎng)化合物的半衰期。

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